Osteoarthritis (OA) jẹ ọkan ninu awọn arun isẹpo egungun degenerative igba pipẹ ti o ni ipa lori awọn eniyan agbalagba ti o ju 65 [65]
1]. Ni gbogbogbo, awọn alaisan OA ni a ṣe ayẹwo pẹlu kerekere ti o bajẹ, synovium inflamed, ati awọn chondrocytes eroded, eyiti o fa irora ati aapọn ti ara [
2]. Irora arthritic jẹ pataki julọ nipasẹ ibajẹ ti kerekere ninu awọn isẹpo nipasẹ iredodo, ati nigbati kerekere ba ti bajẹ awọn eegun ti o bajẹ le ṣe ikọlura pẹlu ara wọn nfa irora ti ko le farada ati inira ti ara [
3]. Ilowosi ti awọn olulaja ipalara pẹlu awọn aami aisan bi irora, wiwu, ati lile ti isẹpo ti wa ni akọsilẹ daradara. Ninu awọn alaisan OA, awọn cytokines iredodo, eyiti o fa ogbara ti kerekere ati egungun subchondral ni a rii ninu ṣiṣan synovial [
4]. Awọn ẹdun ọkan pataki meji ti awọn alaisan OA ni gbogbogbo jẹ irora ati igbona synovial. Nitorina awọn ibi-afẹde akọkọ ti awọn itọju OA lọwọlọwọ ni lati dinku irora ati igbona. [
5]. Botilẹjẹpe awọn itọju OA ti o wa, pẹlu awọn oogun ti kii-sitẹriọdu ati awọn oogun sitẹriọdu, ti jẹri awọn ipa ni idinku irora ati igbona, awọn lilo igba pipẹ ti awọn oogun wọnyi ni awọn abajade ilera to lagbara gẹgẹbi iṣọn-ẹjẹ ọkan, ikun-inu, ati awọn ailagbara kidirin.
6]. Nitorinaa, oogun ti o munadoko diẹ sii pẹlu awọn ipa ẹgbẹ diẹ ni lati ni idagbasoke fun itọju osteoarthritis.
Awọn ọja ilera adayeba ti n pọ si olokiki fun ailewu ati irọrun wa [
7]. Awọn oogun Koria ti aṣa ti fihan awọn ipa ti o lodi si ọpọlọpọ awọn arun iredodo, pẹlu arthritis [
8]. Aucklandia lappa DC. ni a mọ fun awọn ohun-ini oogun rẹ, gẹgẹbi imudara kaakiri ti qi fun imukuro irora ati itunu ikun, ati pe a ti lo ni aṣa bi analgesic adayeba [
9]. Awọn ijabọ iṣaaju daba pe A. lappa ni egboogi-iredodo [
10,
11], analgesic [
12], anticancer [
13], ati gastroprotective [
14] awọn ipa. Awọn oriṣiriṣi awọn iṣẹ ṣiṣe ti ibi-ara ti A. lappa ni o ṣẹlẹ nipasẹ awọn agbo ogun ti nṣiṣe lọwọ pataki: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone ati costuslactone.
15]. Awọn ijinlẹ iṣaaju sọ pe costunolide ṣe afihan awọn ohun-ini egboogi-iredodo ni lipopolysaccharide (LPS), eyiti o fa awọn macrophages nipasẹ ilana ti NF-kB ati ọna amuaradagba mọnamọna ooru [1]
16,
17]. Sibẹsibẹ, ko si iwadi ti ṣe iwadii awọn iṣẹ ṣiṣe ti o pọju ti A. lappa fun itọju OA. Iwadi ti o wa lọwọlọwọ ti ṣe iwadii awọn ipa itọju ailera ti A. lappa lodi si OA nipa lilo (monosodium-iodoacetate) MIA ati awọn awoṣe rodent ti o fa acetic acid.
Monosodium-iodoacetate (MIA) jẹ olokiki lo lati ṣe agbejade pupọ ninu awọn ihuwasi irora ati awọn ẹya pathophysiological ti OA ninu awọn ẹranko.
18,
19,
20]. Nigbati a ba fi itọsi sinu awọn isẹpo orokun, MIA ṣe idamu iṣelọpọ ti chondrocyte ati ki o fa igbona ati awọn aami aiṣan iredodo, gẹgẹbi kerekere ati ogbara egungun subchondral, awọn ami aisan akọkọ ti OA.
18]. Idahun kikọ ti o fa pẹlu acetic acid ni a gba kaakiri bi iṣeṣiro ti irora agbeegbe ninu awọn ẹranko nibiti irora iredodo le ṣe iwọn ni iwọn.
19]. Laini sẹẹli macrophage Asin, RAW264.7, jẹ lilo olokiki lati ṣe iwadi awọn idahun cellular si iredodo. Nigbati o ba mu ṣiṣẹ pẹlu LPS, RAW264 macrophages mu awọn ipa ọna iredodo ṣiṣẹ ati aṣiri ọpọlọpọ awọn agbedemeji iredodo, bii TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ati IL-6.
20]. Iwadi yii ti ṣe ayẹwo awọn ipa ti egboogi-nociceptive ati egboogi-iredodo ti A. lappa lodi si OA ni awoṣe eranko MIA, awoṣe eranko ti acetic acid, ati awọn sẹẹli RAW264.7 ti nṣiṣẹ LPS.
2. Awọn ohun elo ati Awọn ọna
2.1. Ohun elo ọgbin
Gbongbo ti o gbẹ ti A. lappa DC. ti a lo ninu idanwo naa ni a ra lati ọdọ Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). O jẹ idanimọ nipasẹ Ọjọgbọn Donghun Lee, Dept. ti oogun oogun Herbal, Col. ti Oogun Korea, Ile-ẹkọ giga Gachon, ati pe nọmba apẹẹrẹ iwe-ẹri ti wa ni ifipamọ bi 18060301.
2.2. HPLC Analysis of A. lappa jade
A. lappa ti fa jade ni lilo ohun elo isọdọtun (omi distilled, wakati 3 ni 100 °C). Ojutu ti a fa jade ni a sisẹ ati di pọ pẹlu lilo evaporator titẹ kekere. A. lappa jade ni ikore ti 44.69% lẹhin didi-gbigbẹ labẹ -80 °C. Chromatographic igbekale ti A. lappa ti a waiye pẹlu kan HPLC ti sopọ nipa lilo a 1260 InfinityⅡ HPLC-eto (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Fun iyapa chromatic, iwe EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ni a lo ni 35 °C. Lapapọ 100 miligiramu ti apẹrẹ jẹ ti fomi ni 10 milimita ti 50% methanol ati sonicated fun iṣẹju mẹwa 10. Awọn ayẹwo ni a fiwe pẹlu àlẹmọ syringe (Waters Corp., Milford, MA, USA) ti 0.45 μm. Apapọ alakoso alagbeka jẹ 0.1% phosphoric acid (A) ati acetonitrile (B) ati iwe ti a ti yọ bi atẹle: 0-60 min, 0%; 60–65 iṣẹju, 100%; 65–67 iṣẹju, 100%; 67-72 min, 0% epo B pẹlu iwọn sisan ti 1.0 mL / min. A ṣe akiyesi itujade ni 210 nm nipa lilo iwọn abẹrẹ ti 10 μL. Onínọmbà naa ṣe ni ilọpo mẹta.
2.3. Animal Housing ati Management
Awọn eku Sprague-Dawley (SD) ti ọjọ ori ọsẹ 5 ati awọn eku ọkunrin ICR ti o jẹ ọsẹ 6 ni wọn ra lati Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). A tọju awọn ẹranko sinu yara kan ni lilo iwọn otutu igbagbogbo (22 ± 2 °C) ati ọriniinitutu (55 ± 10%) ati ina/iwọn dudu ti 12/12 h. Awọn ẹranko ni a mọ pẹlu ipo fun diẹ ẹ sii ju ọsẹ kan ṣaaju ki idanwo naa bẹrẹ. Awọn ẹranko ni ipese libitum ipolowo ti ifunni ati omi. Awọn ofin ihuwasi lọwọlọwọ fun itọju ẹranko ati mimu ni Ile-ẹkọ giga Gachon (GIACUC-R2019003) ni a tẹle ni muna ni gbogbo awọn ilana idanwo ẹranko. Iwadi naa jẹ apẹrẹ afọju oluṣewadii ati idanwo ti o jọra. A tẹle ọna euthanasia ni ibamu si awọn itọnisọna ti Igbimọ Ethics Experimental Eranko.
2.4. MIA Abẹrẹ ati Itọju
Awọn eku ti ya sọtọ laileto si awọn ẹgbẹ mẹrin, eyun sham, iṣakoso, indomethacin, ati A. lappa. Ti o ba jẹ anesthetized pẹlu 2% isofluorane O2 adalu, awọn eku ti a itasi lilo 50 μL ti MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularly sinu orokun isẹpo lati ja si esiperimenta OA. Awọn itọju naa ni a ṣe bi isalẹ: iṣakoso ati awọn ẹgbẹ sham ni itọju nikan pẹlu ounjẹ ipilẹ AIN-93G. Nikan, ẹgbẹ indomethacin ni a pese pẹlu indomethacin (3 mg / kg) ti a dapọ si ounjẹ AIN-93G ati ẹgbẹ A. lappa 300 mg / kg ti a yàn si AIN-93G onje afikun pẹlu A. lappa (300 mg / kg). Awọn itọju naa ni a tẹsiwaju fun awọn ọjọ 24 lati ọjọ ifasilẹ OA ni iwọn 15-17 g fun 190-210 g iwuwo ara ni ipilẹ ojoojumọ.
2.5. Iwọn Iwọn Iwọn
Lẹhin ifilọlẹ OA, wiwọn agbara iwuwo ti awọn ẹsẹ hind ti awọn eku ni a ṣe pẹlu ailagbara-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) bi a ti ṣeto. Pipin iwuwo lori awọn ẹsẹ ẹhin jẹ iṣiro: agbara gbigbe iwuwo (%)
